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pMSV-GFP 【Supplier来源】BioVector NTCC质粒载体菌种细胞蛋白抗体基因保藏中心www.biovector.net 【Description描述】构建小鼠pMSV Slfn5 GFP 基因重组表达质粒及基因结构分析。方法 提取小鼠肝脏组织中总RNA,反转录为cDNA。PCR扩增小鼠Slfn5编码序列片段,并与pGEM T Easy载体连接,连接产物转化到大肠埃希菌DH5α中。挑取阳性克隆提取质粒,经限制性内切酶HpaⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定。酶切鉴定正确的质粒送Macrogen USA测序。测序正确的质粒通过Hind Ⅲ和XhoⅠ与pMSV GFP连接,并命名为pMSV Slfn5 GFP。通过UCSC(http://genome.ucsc.Edu/) 分析小鼠Slfn5及其家族基因组结构,并通过NCBI确定了Slfn5的蛋白结构域。结果 Slfn5全长基因序列克隆到表达载体pMSV GFP中,酶切鉴定片段大小为2.5 kb。Slfn5的AAA4蛋白结构域由phylogeny.fr确定了该结构在Slfn蛋白家族中的保守性。结论 成功构建了小鼠pMSV Slfn5 GFP全长基因表达载体,Slfn5的AAA4蛋白结构域由phylogeny.fr确定了该结构在Slfn蛋白家族中的保守性。
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