BioVector® ASC52telo 人脂肪源间充质干细胞永生化株技术档案 / BioVector® ASC52telo Human Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cell Line Datasheet

一、 背景与来源说明

ASC52telo 细胞株衍生自正常人脂肪组织提取的间充质干细胞（Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells, ADSCs）。该细胞株通过逆病毒载体介导转染人端粒酶逆转录酶基因（hTERT）构建而成。hTERT 的过表达有效克服了原代间充质干细胞（MSC）在体外长期传代过程中的复制性衰老（Replicative Senescence）问题。ASC52telo 既保留了原代 MSC 的多向分化潜能（成骨、成软骨、成脂分化）与免疫表型特征，又具备无限增殖能力与高度的基因组稳定性，是组织工程、再生医学、干细胞外囊泡（EVs/外体）提取以及干细胞药物开发的标准细胞模型。

二、 细胞生物学特征

• 组织来源：人（Homo sapiens）脂肪组织（Adipose Tissue）

• 细胞形态：贴壁生长，呈典型成纤维细胞样（Fibroblast-like）梭形延伸形态

• 表面标志物表型（MSC Surface Markers）：

  • 阳性表达（> 95%）：CD29, CD44, CD73 (NT5E), CD90 (Thy-1), CD105 (Endoglin)

  • 阴性表达（< 2%）：CD14, CD31 (PECAM-1), CD34, CD45 (LCA), HLA-DR

• 三系分化潜能（Trilineage Differentiation Potential）：

  • 成脂分化（Adipogenesis）：在诱导剂作用下形成富含中性脂滴的脂滴细胞（茜素红/油红 O 染色阳性）。

  • 成骨分化（Osteogenesis）：形成钙化结节（钙沉积，茜素红 S 染色阳性）。

  • 成软骨分化（Chondrogenesis）：在 3D 团聚培养下表达软骨基质（阿利新蓝染色阳性）。

三、 培养条件与传代指南

1. 完全培养基配方

• 基础培养基：Mesenchymal Stem Cell Basal Medium 或 Alpha-MEM / DMEM/F-12 (1:1)

• 添加剂与血清：

  • 10% 优质干细胞专用胎牛血清（MSC-Qualified FBS）或 5% 人血小板裂解液（hPL）

  • 2–5 ng/mL 人碱性成纤维细胞生长因子（bFGF / FGF-2）

  • 2 mM L-谷氨酰胺（L-Glutamine）

  • 100 U/mL 青霉素 + 100 ug/mL 链霉素

• 筛选抗性（用于保持永生化标记）：加压维持可选择性添加 G418 或 Hygromycin B（依据构建载体质控说明）。

2. 培养环境与传代规范

• 培养环境：37°C，5% CO2，饱和湿度。

• 传代密度控制：细胞密度达到 70% – 80% 时必须传代。切勿让细胞生长至 100% 满融，否则会导致细胞密度抑制并降低后续的分化潜能。

• 消化操作：使用 0.25% Trypsin - 0.02% EDTA 或 TrypLE Express，37°C 消化 2–3 分钟。加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打分散。

四、 技术指标简表

BioVector® ASC52telo Human Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cell Line Datasheet

1. Background & Context

The ASC52telo cell line is an immortalized human adipose-derived mesenchymal stem cell (ADSC) line established by retroviral transduction of the human telomerase reverse transcriptase (hTERT) gene into primary human ADSCs. Overexpression of hTERT prevents replicative senescence during long-term in vitro passage while maintaining key stem cell attributes. ASC52telo retains multipotent differentiation capacity (adipogenic, osteogenic, and chondrogenic lineages) along with canonical MSC immunophenotypic markers, providing a highly reproducible and scalable non-tumorigenic model for tissue engineering, extracellular vesicle (EV) production, and regenerative medicine research.

2. Biological Characteristics

• Organism & Tissue:Homo sapiens (Human), adipose tissue.

• Growth Properties: Adherent, spindle-shaped fibroblast-like morphology.

• Immunophenotypic Profile (Surface Markers):

  • Positive Markers (> 95%): CD29, CD44, CD73, CD90, CD105.

  • Negative Markers (< 2%): CD14, CD31, CD34, CD45, HLA-DR.

• Trilineage Multipotency:

  • Adipogenesis: Accumulation of intracellular lipid droplets (Oil Red O positive).

  • Osteogenesis: Mineralized extracellular matrix deposition (Alizarin Red S positive).

  • Chondrogenesis: Synthesis of sulfated glycosaminoglycans in micromass culture (Alcian Blue positive).

3. Culture & Handling Protocols

3.1 Complete Growth Medium Formulations

• Basal Medium: Mesenchymal Stem Cell Basal Medium or Alpha-MEM / DMEM/F-12 (1:1).

• Supplements & Serum:

  • 10% MSC-Qualified Fetal Bovine Serum (FBS) or 5% Human Platelet Lysate (hPL).

  • 2–5 ng/mL Recombinant Human bFGF (FGF-2).

  • 2 mM L-Glutamine.

  • Antibiotics: 100 U/mL Penicillin + 100 ug/mL Streptomycin.

3.2 Incubation & Subculture Parameters

• Incubation Conditions: 37°C, 5% CO2, humidified atmosphere.

• Subculture Confluency: Subculture when cells reach 70% – 80% confluency. Avoid letting cultures reach 100% saturation to prevent contact inhibition and loss of differentiation potential.

• Detachment: Treat with 0.25% Trypsin - 0.02% EDTA or TrypLE Express at 37°C for 2–3 minutes. Neutralize with serum-containing medium and gently dissociate into a single-cell suspension.

4. Technical Data Summary

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