BioVector® pLenti-CMV-IRS4-Myc/His-Puro 慢病毒表达质粒 / BioVector® pLenti-CMV-IRS4-Myc/His-Puro Lentiviral Expression Plasmid

通用定义 / General Definition:BioVector® pLenti-CMV-IRS4-Myc/His-Puro 是一种基于第三代慢病毒系统的哺乳动物表达载体，专门设计用于在靶细胞中实现 IRS4 (胰岛素受体底物 4) 蛋白的高效整合与稳定表达。该质粒利用强力的 CMV 启动子 驱动 IRS4 的转录，并在其 C 端融合了 Myc 和 His 双标签，方便通过免疫印迹 (WB)、免疫共沉淀 (Co-IP) 或亲和层析进行蛋白检测与纯化。载体同时携带 Puro (嘌呤霉素) 抗性基因，允许研究人员筛选建立稳定表达 IRS4 的细胞株。IRS4 是胰岛素和细胞因子信号转导中的重要接头蛋白，常在多种癌症和代谢研究中被深入探讨。

BioVector® pLenti-CMV-IRS4-Myc/His-Puro is a third-generation lentiviral expression vector designed for the stable integration and high-level expression of IRS4 (Insulin Receptor Substrate 4) in mammalian cells. The vector utilizes a robust CMV promoter to drive IRS4 transcription and features C-terminal Myc and His tags to facilitate protein detection, pull-down assays, or purification. Additionally, it contains a Puro (Puromycin) resistance marker for the selection of stable cell lines. IRS4 acts as a critical adaptor protein in insulin and cytokine signaling pathways and is frequently investigated in oncogenesis and metabolic disorder research.

BioVector® pLenti-CMV-IRS4-Myc/His-Puro 技术说明书 (Technical Datasheet)

中文版说明书 (Chinese Datasheet)

1. 质粒基本信息

• 载体类型： 慢病毒表达载体 (Lentiviral Expression Vector)

• 启动子： CMV (Cytomegalovirus) 启动子

• 插入片段： 人或小鼠 IRS4 (Insulin Receptor Substrate 4)

• 融合标签： C-terminal Myc-His 双标签

• 筛选标记： Puromycin (嘌呤霉素)

• 克隆位点： 通常位于 MCS 多克隆位点

• 细菌抗性： 氨苄青霉素 (Ampicillin, 100 mg/L)

2. 核心生物学功能

• 稳定转导： 慢病毒系统可高效感染分裂和非分裂细胞，并将 IRS4 基因组整合至宿主染色体。

• 信号通路研究： 探索 IRS4 对 PI3K/Akt 和 MAPK 信号通路的调节作用。

• 蛋白互作： 利用 Myc/His 标签通过质谱或 Co-IP 鉴定 IRS4 的下游结合伙伴。

3. 实验应用方案

• 病毒包装： 需配合包装系统（如 pMD2.G 和 psPAX2）在 293T 细胞中进行病毒生产。

• 稳转株建立： 感染靶细胞后，通过梯度浓度的嘌呤霉素进行抗性筛选。

• 功能验证： 通过 Western Blot 验证 IRS4-Myc/His 的表达情况。

4. 注意事项

• 生物安全： 包装后的病毒颗粒必须在生物安全二级 (BSL-2) 环境下操作。

• 片段长度： 由于 IRS4 编码区较长，请确保病毒包装效率，必要时进行病毒浓缩。

English Datasheet

1. Basic Plasmid Information

• Vector Type: Lentiviral Expression Vector

• Promoter: CMV (Cytomegalovirus)

• Insert: Human or Mouse IRS4 (Insulin Receptor Substrate 4)

• Fusion Tags: C-terminal Myc-His dual tags

• Selection Marker: Puromycin (Puro)

• Bacterial Selection: Ampicillin (100 mg/L)

• Replicon: pUC ori

2. Key Biological Functions

• Stable Expression: Capable of mediating long-term stable expression in a wide range of mammalian cell types via genomic integration.

• Signaling Analysis: Serving as a tool to investigate the impact of IRS4 over-expression on insulin signaling and cell proliferation.

• Tag Utility: The Myc/His tandem tags enable high-specificity detection using anti-Myc/His antibodies and simplified protein purification via IMAC (Immobilized Metal Affinity Chromatography).

3. Applications

• Lentiviral Production: Standard transfection into 293T cells using a 3-plasmid packaging system.

• Stable Line Generation: Selection of transduced cells using Puromycin following viral infection.

• Pathway Profiling: Analyzing phosphorylation patterns of Akt or ERK in response to IRS4 expression.

4. Key Usage Notes

• Biosafety: Handle as BSL-2 material once packaged into viral particles.

• Sequence Integrity: BioVector® recommends verifying the IRS4-Myc-His junction via Sanger sequencing to ensure the reading frame is correct.

注意 / Note: 质粒应储存在 -20 摄氏度。在使用 CMV 启动子时，需注意某些特定的细胞系（如干细胞）可能会发生启动子沉默现象。Store at -20°C. When using the CMV promoter, be aware that promoter silencing can occur in certain cell types, such as stem cells or primary neurons.

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