HEK293T-SLC35A1-KO BioVector®人胚胎肾细胞基因敲除株-用于优化 AAV9 病毒的转导效力分析Human embryonal kidney cell line

BioVector® HEK293T-SLC35A1-KO 细胞系是基于广泛使用的 HEK293T 细胞开发的基因敲除株，专门用于优化 AAV9 病毒的转导效力分析。

• 细胞名称: HEK293T-SLC35A1-KO

• DSMZ 编号: ACC 988

• 物种: 人类 (Homo sapiens)

• 细胞类型: 胚胎肾细胞 (HEK293T 衍生株)

• 生物安全等级: 1 (德国基因工程法分级为 S1) [x, z]

• 许可与限制: A; D (需遵守相关分发与使用限制)

• 建立背景: 2021年利用 CRISPR/Cas9 技术对 293T (HEK293T) 细胞进行基因编辑而成。 [x]

• 修饰目标: 敲除了编码 CMP-唾液酸转运蛋白的 SLC35A1 基因，导致该蛋白水平降低或缺失。 [x]

• 应用特性: 由于 SLC35A1 基因的功能性敲除，该细胞对 腺相关病毒 9 型 (AAV9) 的转导敏感性显著增加，因此非常适用于 AAV9 转导效力检测 (Potency Assays)。 [x]

• 风险评估: 亲本 293T 细胞通过转染腺病毒 5 型 (Ad5) 片段建立，包含 E1a、E1b 和 E4 基因，但不产生具有活性的病毒。 [z]

• 参考文献: 40955 [x]

• 形态学: 成纤维细胞样，贴壁呈单层生长。 [x]

• 培养基: 90% DMEM (高糖) + 10% 热灭活胎牛血清 (h.i. FBS)。 [x]

• 传代比例: 待培养物达到半融合状态后，按照 1:10 至 1:20 的比例传代，每 2-4 天一次。 [x]

• 传代技巧: 该细胞贴壁力较弱，无需使用 Trypsin/EDTA，仅通过吹打或轻敲培养瓶即可使细胞脱落。 [x]

• 接种密度: 80 cm² 培养瓶建议接种量约 1-2 x 10⁶ 个细胞。 [x]

• 培养条件: 37 °C, 10% CO₂（注意：CO₂ 浓度高于常规 5%）。 [x]

• 倍增时间: 约 24 小时。 [x]

• 收获产量: 80 cm² 培养瓶满瓶收获量约 15 x 10⁶ 个细胞。 [x]

• 冷冻保存: 70% DMEM, 20% FBS, 10% DMSO。 [x]

• 支原体检测: PCR 检测结果为阴性。 [x]

• 真实性检测: STR 分析证实其分型与参考数据库中的 293T (ACC 635) 完全一致。 [x]

• 病毒检测 (PCR): EBV, HBV, HCV, HIV-1/2, HTLV-1/2, MLV 均为阴性。 [x]

Cell Line Datasheet - English Version

• Cell Line Name: HEK293T-SLC35A1-KO

• DSMZ No.: ACC 988 [x]

• Species: Human (Homo sapiens) [x]

• Cell Type: Embryonal kidney (HEK293T derivative) [x]

• Biosafety Level: 1 / GMO-S1 [x, z]

• Permissions/Restrictions: A; D [x]

• Establishment: Established in 2021 via CRISPR/Cas9 mediated modification of the 293T (HEK293T) cell line. [x]

• Modification: Functional knockout of the SLC35A1 gene (encoding CMP-sialic acid transporter), leading to absent or decreased levels of the protein. [x]

• Key Application: This modification results in increased susceptibility to transduction with Adeno-Associated Virus 9 (AAV9), making these cells ideal for AAV9 transduction potency assays. [x]

• Risk Assessment: Parental 293T cells contain fragments of Adenovirus type 5 (E1a, E1b, and E4 genes). No active viruses are produced. [z]

• Reference: 40955 [x]

• Morphology: Fibroblastoid cells growing adherently as a monolayer. [x]

• Culture Medium: 90% DMEM (high glucose) + 10% heat-inactivated FBS. [x]

• Subculture: Split semi-confluent cultures 1:10 to 1:20 every 2-4 days. [x]

• Handling Tip: Cells can be detached simply by pipetting and tapping the flask; Trypsin/EDTA is not required. [x]

• Seeding Density: Approx. 1-2 x 10⁶ cells per 80 cm² flask. [x]

• Incubation: 37 °C with 10% CO₂. [x]

• Doubling Time: Approx. 24 hours. [x]

• Harvest Yield: Approx. 15 x 10⁶ cells per 80 cm² flask. [x]

• Storage/Freezing: 70% DMEM, 20% FBS, 10% DMSO. [x]

• Mycoplasma: Negative (PCR assay). [x]

• Authenticity: STR profile confirmed as identical to the parental 293T (ACC 635) line. [x]

• Species Validation: Confirmed as human. [x]

• Viral Testing (PCR): Negative for EBV, HBV, HCV, HIV-1, HIV-2, HTLV-1/2, and MLV. [x]

Supplier生产厂家:

BioVector NTCC质粒载体菌种细胞蛋白抗体基因保藏中心

BioVector NTCC Inc.

TEL: 400-800-2947

E-mail: biovector@163.com

工作微信/QQ同号: 1843439339

http://www.biovector.net