pEGSH-Luc BioVector TM哺乳动物细胞诱导型荧光报告质粒载体Complete Control Inducible Mammalian Expression System plasmid

BioVector TM pEGSH-Luc 是一种用于哺乳动物细胞的诱导型报告质粒，通常与 Complete Control 诱导型表达系统配合使用。

• 载体类型： 哺乳动物细胞诱导型报告载体 (Inducible Reporter Vector)。

• 报告基因： 萤火虫荧光素酶 (Firefly Luciferase, Luc)。

• 诱导系统： 基于昆虫激素 蜕皮激素 (Ecdysone) 及其类似物 Ponasterone A 的诱导机制。

• 选择标记： 含有 Hygromycin (潮霉素) 抗性基因，用于在哺乳动物细胞中进行稳定株筛选。

• 克隆大小： 约 5.7 kb。

1. 高诱导倍数： 与常规系统相比，该系统具有极低的背景表达（漏表达低），在加入诱导剂后可实现超过 1,000 倍 的诱导表达比。

2. 作用机制：

   • 该质粒含有 E/GRE (蜕皮激素/糖皮质激素响应元件) 启动子。

   • 需要与表达蜕皮激素受体的载体（如 pERV3）共转染。

   • 当诱导剂（如 Ponasterone A）存在时，受体复合物结合到 E/GRE 元件上，激活萤火虫荧光素酶的转录。

   
   

3. 应用场景：

   • 启动子活性分析： 研究基因调控。

   • 药物筛选： 测试化合物对特定信号通路的影响。

   • 时间控制实验： 需要在特定时间点开启基因表达的实验。

   
   

• 储存： 收到质粒后应存放在 -20°C。

• 转化： 建议使用 DH5α 或类似的感受态大肠杆菌进行质粒扩增。

• 诱导剂： 常用诱导剂为 Ponasterone A，通常在转染后 24-48 小时加入。

BioVector TM

• Vector Type: Inducible reporter plasmid for mammalian expression.

• Reporter Gene: Firefly luciferase (Luc).

• Inducible System: Based on the insect hormone ecdysone (and its analogue, Ponasterone A).

• Selection Marker: Typically confers resistance to Hygromycin in mammalian cells to facilitate stable cell line generation.

• Induction Mechanism: Induction occurs when the ecdysone receptor (expressed by a co-transfected vector like pERV3) binds to the E/GRE (ecdysone/glucocorticoid response elements) upstream of the luciferase gene in the presence of an inducer.

• Performance: Can achieve induction ratios exceeding 1,000-fold with low basal background expression.

• Reporter Assays: Measuring the strength of ecdysone-inducible responses in various cell lines.

• Functional Genomics: Studying the timing and dosage of gene expression by using luciferase as a quantifiable proxy.

• Screening: Identifying inhibitors or modulators of specific biological pathways.