MFDpir BioVector®用于转座子诱变和接合转移的大肠杆菌供体菌E. coli

BioVector® MFDpir 菌株（Mu-Free Donor pir+）是一种专门用于转座子诱变和通过结合作用（Conjugation）进行质粒转移的大肠杆菌（E. coli）供体菌。它由巴斯德研究所（Institut Pasteur）开发，旨在解决传统供体菌（如 S17-1 λpir）中存在的噬菌体 Mu 污染问题。

• 学名：Escherichia coli MFDpir

• 母本菌株： MG1655 (K-12 衍生株)

• 主要功能： 作为供体菌，动员具有 RP4 来源 oriT 的质粒转移。

• 开发机构： BioVector NTCC Inc.

基因型与表型特征

• 完整基因型： MG1655 RP4-2-Tc::[ΔMu1::aac(3)IV-ΔaphA-Δnic35-ΔMu2::zeo] ΔdapA::(erm-pir) ΔrecA。

• Pir 蛋白表达： 含有 pir 基因，能够支持依赖 Pi (π) 蛋白复制的质粒（如具有 R6K 复制起始位点的质粒）。

• DAP 营养缺陷型： 缺失了 dapA 基因，生长时必须添加 0.3 mM 二氨基庚二酸 (DAP)。这使得在接合实验后，可以通过去除 DAP 轻松筛选掉供体菌。

• 抗生素抗性： 对阿普拉霉素 (Apramycin) (30 mg/L)、博来霉素 (Zeocin) (50 mg/L) 和红霉素 (Erythromycin) (200 mg/L) 具有抗性。

• RecA 缺失：recA 基因的缺失防止了同源重组，确保了质粒在菌株内的稳定性。

• 培养基： 标准 LB 肉汤或琼脂，需额外添加 0.3 mM DAP。

• 培养温度： 37 °C。

• 大气环境： 需氧。

• 登录号：NCBI GenBank CP060708。

• 基因组大小： 4,686,434 bp。

• GC 含量： 50.9%。

BioVector®

• Scientific Name:Escherichia coli MFDpir

• Parent Strain: MG1655 (K-12 derivative)

• Function: Donor strain for mobilizing RP4-dependent oriT plasmids.

• Origin: BioVector NTCC Inc.

• Full Genotype: MG1655 RP4-2-Tc::[ΔMu1::aac(3)IV-ΔaphA-Δnic35-ΔMu2::zeo] ΔdapA::(erm-pir) ΔrecA.

• Pir Protein Expression: Encodes the pir gene, making it compatible with plasmids requiring the Pi (π) protein for replication (e.g., R6K origin-based plasmids).

• DAP Auxotrophy: Contains a deletion in the dapA gene, requiring the addition of 0.3 mM Diaminopimelic Acid (DAP) for growth. This allows for easy counter-selection of the donor strain after conjugation.

• Antibiotic Resistances: Naturally resistant to Apramycin (30 mg/L), Zeocin (50 mg/L), and Erythromycin (200 mg/L) due to genetic modifications.

• RecA Deficiency: Deletion of recA prevents homologous recombination, ensuring the stability of plasmids.

• Growth Media: Standard Luria-Bertani (LB) broth or agar supplemented with 0.3 mM DAP.

• Incubation Temperature: 37 °C.

• Atmosphere: Aerobic.

• Accession Number:CP060708 (NCBI GenBank).

• Genome Size: 4,686,434 bp.

• GC Content: 50.9%.

Supplier生产商：

BioVector NTCC质粒载体菌株细胞蛋白抗体基因保藏中心

E-mail:BioVector@163.com

电话:400-800-2947

工作QQ/微信同号:1843439339

网址 www.biovector.net