pOptiVEC-TOPO BioVector®双顺反子哺乳动物高水平表达载体DHFR筛选-用于大规模抗体或重组蛋白生产BioVector NTCC Inc.

BioVector® pOptiVEC-TOPO 是一种双顺反子（Bicistronic）哺乳动物表达载体，主要用于通过 DHFR 筛选和基因扩增技术，在 CHO-DG44 细胞中实现高水平的蛋白质表达。

• 启动子： 采用人类巨细胞病毒 (CMV) 早期启动子/增强子，确保高水平的组成型表达。

• 双顺反子设计： 包含脑心肌炎病毒 (ECMV) 的 IRES（内部核糖体进入位点），使目的基因与 DHFR 筛选标记在同一条 mRNA 上转录。

• 克隆技术： 经过 TOPO 活化处理，可直接与 PCR 产物进行快速、高效（效率 >85%）的连接。

• 筛选标记：

  • 哺乳动物细胞： 小鼠二氢叶酸还原酶 (DHFR)，用于在 DHFR 缺陷型细胞中进行稳定转株筛选及基因扩增。

  • 原核生物： 氨苄青霉素抗性 (AmpR)，用于在大肠杆菌中进行质粒扩增。

  
  

技术规格

• 载体大小： 约 4.4 kb。

• 适用系统： 通常作为 OptiCHO 表达系统 或 Freedom DG44 Kit 的一部分使用，用于大规模抗体或重组蛋白生产。

BioVector®pOptiVEC-TOPO is a bicistronic mammalian expression vector primarily used for high-level protein production in CHO-DG44 cells through DHFR-based selection and amplification.

• Promoter: Human cytomegalovirus (CMV) immediate-early promoter/enhancer for high-level constitutive expression.

• Bicistronic Design: Features an IRES (Internal Ribosome Entry Site) from the encephalomyocarditis virus (ECMV) that allows the gene of interest and the DHFR selection marker to be transcribed on a single mRNA transcript.

• Cloning System: TOPO-adapted for rapid, high-efficiency (>85%) cloning of PCR products.

• Selection Markers:

  • Mammalian: Mouse dihydrofolate reductase (DHFR) for stable cell line development and genomic amplification in DHFR-deficient cells.

  • Bacterial: Ampicillin resistance (AmpR) for propagation in E. coli.

  
  

• Replication Origin: High-copy pUC origin for efficient plasmid production in bacteria.

• Size: Approximately 4.4 kb.

• Host System: Specifically designed for use with the OptiCHO Express Kit or Freedom DG44 Kit for scaling up protein expression.

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