pEE6.4哺乳细胞抗体蛋白表达质粒

pEE6.4哺乳细胞抗体蛋白表达质粒
启动子: hCMV-MIE 复制子: pEE6 ori 终止子: SV40 poly(A) signal 质粒分类: 哺乳细胞，抗体表达载体 质粒大小: 5067bp 原核抗性: 氨苄青霉素Amp 克隆菌株: 大肠杆菌DH5α 培养条件: 37℃，有氧，LB 表达宿主: 哺乳细胞 诱导方式: 无须诱导，瞬时表达 5'测序引物: CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG 3'测序引物: 根据序列设计引物 质粒简介 Lonza生物公司的Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表达系统载体pEE6.4载体，利用谷氨酰胺合成酶筛选标记，能够高水平的在哺乳细胞内表达目的基因。GS酶是生物体内以谷氨酸和氨为底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能够被甲硫氨酸砜亚胺（methionine sulphoximine，MSX）选择性的抑制。一些哺乳动物细胞，例如小鼠骨髓瘤细胞(NSO细胞系)无法表达GS，所以在不添加谷氨酰胺的情况下， 细胞将无法生长。对于这些细胞系，在无谷氨酰胺的培养基内，一个转染的GS基因可以作为一个筛选标记。其他的一些细胞系，例如CHO-KI，能够产生内源 性的GS酶。对于这些细胞，在无谷氨酰胺培养基内，在高水平足够抑制GS酶合成的MSX（甲硫氨酸砜亚胺）的作用下，可以对细胞的生长提供一个选择压力。

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